Əhəmiyyətli funksiyalarına görə zülallar qidalanma, tibbi və sənaye tətbiqləri üçün geniş istifadə olunur. Bu dərsdə böyük miqdarda xüsusi bir zülalın necə əmələ gəldiyini öyrənəcəyik.
Bu dərsin sonunda siz bu barədə biləcəksiniz
Rekombinant DNT texnologiyası böyük miqdarda xüsusi zülal yaratmaq üçün vacib bir yoldur. Bu, bir çox mənbədən olan genetik materialı bir araya gətirmək və təbii olaraq genomda tapılmayan DNT ardıcıllıqlarını yaratmaq üçün genetik rekombinasiyadan istifadəni nəzərdə tutur. Rekombinant DNT texnologiyası ilə istehsal olunan zülallar R e kombinant zülallardır.
Rekombinant DNT (rDNT) iki və ya daha çox DNT ardıcıllığının birləşməsindən əmələ gələn DNT zənciridir. Genetik rekombinasiya təbii olaraq baş verən bir prosesdir, lakin süni şəkildə manipulyasiya edildikdə, rekombinant DNT texnologiyası adlanır. rDNA texnologiyasından istifadə edərək alimlər normal şəraitdə və ətraf mühit şəraitində təbii olaraq mövcud olmayan yeni DNT ardıcıllıqları yarada bilirlər.
Nəticədə rekombinant DNT hədəf zülalın genlərinin klonlandığı plazmiddən ibarətdir. Plazmid ev sahibi ifadə sisteminə daxil edildikdə, ev sahibinin öz zülal sintezi yolları daha sonra seçilmiş zülalın - rekombinant zülalın ifadəsi ilə nəticələnəcəkdir. Bu, tədqiqat, diaqnostik və ya hətta terapevtik istifadə üçün böyük miqdarda müəyyən bir protein təmin edir.
Zülalları təbii mənbələrindən sadəcə təcrid etmək zülallara artan tələbatı ödəyə bilməz. Rekombinant DNT texnologiyası böyük miqdarda zülal əldə etmək üçün daha səmərəli üsul təqdim edir.
Dərman hazırlanmasında və ya tədqiqatında istifadə edilə bilən bir sıra rekombinant zülal növləri mövcuddur. Bunlardan bəziləri - kemokinlər, interferonlar, koloniya stimullaşdırıcı amillər və böyümə faktorlarıdır.
Rekombinant zülallar bəzi müasir terapevtikləri, məsələn, insan insulinini inkişaf etdirmək üçün istifadə olunur. Bu yaxınlarda təsdiqlənmiş rekombinant zülal dərmanları xərçəng, otoimmün xəstəliklər və genetik pozğunluqlar da daxil olmaqla müxtəlif şərtləri müalicə etmək üçün istifadə olunur.
Texnologiyada əhəmiyyətli irəliləyişlər rekombinant zülalların geniş miqyasda ifadəsini və təcrid olunmasını təmin etmişdir. Ferment, antikor və ya peyvənd istehsalı kimi geniş miqyaslı tətbiqlər üçün tələb olunan protein miqdarı xeyli yüksəkdir. Bunun üçün zülalın ifadə olunduğu sistemin kultura və qulluq üçün asan olması, sürətlə böyüməsi və böyük miqdarda protein istehsal etməsi tələb olunur. Bu tələblər protein ifadə sistemlərinin kəşfinə səbəb oldu.
Zülal ifadə sistemlərinin müxtəlif növləri bakteriya, maya, həşərat və ya məməli sistemləridir.
Rekombinant DNT texnologiyası xarici DNT-nin orqanizmin öz-özünə təkrarlanan genetik elementinə köçürülməsini nəzərdə tutur ki, bu da nəticədə yad DNT-nin gücləndirilməsinə gətirib çıxarır.
Hal-hazırda rekombinant DNT yaratmaq üçün üç əsas üsul var:
1. Transformasiya – Xarici DNT fraqmenti kəsilir və vektora, adətən plazmidə daxil edilir. Sonra, nəticədə vektor xarici DNT fraqmentinin ifadə olunduğu E.coli bakteriyası kimi bir ana hüceyrəyə yerləşdirilir. Bakterial hüceyrənin xarici DNT-ni qəbul etmə prosesi transformasiya adlanır.
2. Qeyri-bakterial transformasiya – Bakteriyalardan ev sahibi hüceyrə kimi istifadə etmir. Bir nümunə DNT mikroinyeksiyasıdır, burada yad DNT birbaşa alıcı hüceyrənin nüvəsinə yeridilir. Biolistics , xarici DNT-ni alıcı hüceyrəyə bombardman etmək üçün yüksək sürətli mikromərmilərin istifadə edildiyi bir üsuldur.
3. Fag introduksiyası – Fag introduksiyasında yad DNT-ni ana hüceyrəyə köçürmək üçün faqdan istifadə edilir və nəticədə tərkibində xarici DNT olan faq DNT-si ana hüceyrənin genomuna daxil edilir.
Rekombinant DNT texnologiyası maraq doğuran zülalın xüsusiyyətləri ilə manipulyasiya etməyə imkan verir. Bu aspektlərdə rekombinant DNT texnologiyası və rekombinant zülallar faydalıdır. Bununla belə, rekombinant DNT texnologiyasının istifadəsinin təhlükəsizliyi və etikası ilə bağlı bəzi narahatlıqlar var.
